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六联式薄膜过滤器操作规程
发布时间:2018-06-19   点击次数:239次
   六联式薄膜过滤器的使用首页要将滤膜及过滤器支架或将过滤器座、漏斗和漏斗盖在使用前采用121℃高压灭菌30分钟。
  1、打开预先灭菌的过滤器支架或将过滤器座、漏斗和漏斗盖在沸水中浸没一分钟作消毒。若没有沸水,用95%酒精喷洒于漏斗和漏斗盖,然后将其点燃,在火熄灭以后,让过滤器冷却至40℃以下,如果必须使用酒精,漏斗必须用耐火材料制造。
  2、用水煮过或火焰灭菌钳子,将无菌过滤器的底座部分安装于过滤烧瓶或真空管道上。
  3、用火烧过的镊子放一张无菌薄膜在过滤器底座上,根据测试目的,使用特定的过滤膜:总菌数/大肠杆菌数:0.45um薄膜,酵母菌和霉菌:0.80um薄膜。
  4、用水煮过或火焰灭菌钳子,将过滤器漏斗和漏斗盖放置于底座上。如漏斗盖带有管口,则在管口处装上过滤器,或予以封住。待过滤器的温度低于40℃后才可加样品。
  5、重复以上步骤,直到所有样品都完成过滤。
  6、将样品直接倒入消毒和冷却的过滤器漏斗中。盖上过滤器漏斗的盖子。若使用勺,须将勺放在95%的酒精的烧杯中。
  7、打开真空泵,使样品通过薄膜。打开装有PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的玻璃瓶,先用火烧螺纹处,然后倒入约20毫升PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液于过滤漏斗内,进行冲洗。施加真空,使PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液通过薄膜。在过滤完样品或PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液后,不要让真空施加时间连续超过30秒以上。
  8、用火焰灭菌钳子从过滤器底座上取下薄膜。轻微提起装有吸收垫和培养基的培养皿的盖子,并放下薄膜,直到镊子相对侧的薄膜边靠到吸收垫边为止。将薄膜贴在吸收垫上滚动,以排除气泡。盖上盖子,在工作台上轻轻拍打培养皿,以驱除薄膜下面的气泡。

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